BIS-TRIS pufer CAS 6976-37-0

Je učinkovit biološki pufer z učinkovitim območjem pufra pH 5,8-7,2 in vrednostjo pKa 6,5 ​​(25 stopinj). V biokemičnih poskusih so številne biomolekule, kot so beljakovine in nukleinske kisline, zelo občutljive na vrednosti pH in že majhne spremembe pH lahko vplivajo na njihovo strukturo in delovanje. BIS-TRIS lahko stabilizira pH-vrednost raztopine znotraj tega pH-območja, kar zagotavlja stabilno okolje za biokemične reakcije. V procesu ločevanja in čiščenja beljakovin se lahko ohrani naravna konformacija beljakovin, da se prepreči denaturacija ali obarjanje zaradi sprememb pH.

Na primer, pri tehnikah čiščenja beljakovin, kot sta ionsko izmenjevalna kromatografija in afinitetna kromatografija, je uporabaMedpomnilnik BIS-TRISlahko zagotovi, da pride do interakcije med proteini in kromatografskimi mediji pod stabilnimi pH pogoji, s čimer se izboljša učinkovitost čiščenja in čistost.

Pri testih encimske aktivnosti je encimska aktivnost pogosto odvisna od specifičnega pH okolja. Vrednost pH reakcijskega sistema je mogoče natančno nadzorovati, da omogočimo encimu, da izvaja katalitično aktivnost pod optimalnimi pH pogoji, s čimer natančno merimo aktivnost encima. To je velikega pomena za proučevanje lastnosti, mehanizmov delovanja in razvoj encimskih pripravkov encimov.

BIS-TRIS ima sposobnost koordinacije z različnimi kovinskimi ioni in tvori stabilne komplekse, kot so Zn ² ⁺ - BIS-TRIS, Mn ² ⁺ - BIS-TRIS itd. Ti kompleksi kovinskih ionov igrajo pomembno vlogo pri preučevanju strukture in delovanja biomolekul. Pri strukturni analizi proteinov kovinski ioni pogosto delujejo kot kofaktorji za sodelovanje pri tvorbi aktivnih centrov v beljakovinah. Z usklajevanjem BIS-TRIS s kovinskimi ioni je mogoče strukturo proteinskih kompleksov kovinskih ionov stabilizirati, kar olajša uporabo tehnik, kot sta rentgenska kristalografija in jedrska magnetna resonanca (NMR) za strukturno analizo.

Na primer, aktivni centri določenih encimov, ki vsebujejo cink, potrebujejo cinkove ione, da ohranijo svojo katalitično aktivnost, kompleksi BIS-TRIS Zn ² ⁺ pa lahko zagotovijo stabilno strukturno okolje za te encime, kar pomaga pri natančni analizi njihovih tri-dimenzionalnih struktur.

Pri raziskavah nukleinskih kislin, kot je sekvenciranje DNA, so lahko kovinski ioni vključeni tudi v zvijanje in funkcionalno regulacijo nukleinskih kislin. Usklajevanje med BIS-TRIS in kovinskimi ioni lahko uravnava lokalno okolje nukleinskih kislin, vpliva na interakcije med nukleinskimi kislinami in proteini, majhnimi molekulami itd., kar zagotavlja močno orodje za-poglobljene raziskave strukture in delovanja nukleinskih kislin.

BIS-TRIS ima pomembne aplikacije v poskusih z elektroforezo beljakovin. SDS-PAGE (elektroforeza v poliakrilamidnem gelu z natrijevim dodecil sulfatom) in naravna PAGE (elektroforeza v nedenaturiranem poliakrilamidnem gelu) sta pogosti tehniki elektroforeze beljakovin.Medpomnilnik BIS-TRISse pogosto uporablja za pripravo elektroforeznega pufra za vzdrževanje stabilnosti pH raztopine med elektroforezo. V SDS-PAGE so proteini denaturirani in negativno nabiti v vzorčnem pufru, ki vsebuje SDS in merkaptoetanol, ter nato ločeni po velikosti molekul v poliakrilamidnem gelu.

Zagotovi lahko stabilnost pH vrednosti pufra za elektroforezo, kar omogoča beljakovinam, da migrirajo na pričakovan način v električnem polju, s čimer natančno ločujejo beljakovine različnih molekulskih mas in zaznavajo njihove relativne molekulske mase.

V Native PAGE proteini ohranijo svojo naravno konformacijo za elektroforetično ločitev. Z njegovo uporabo lahko preprečite denaturacijo beljakovin zaradi sprememb pH, ohranite naravno aktivnost in informacije o konformaciji beljakovin ter pomagate preučevati naravno stanje in interakcije beljakovin.

Western blot je pomembna eksperimentalna tehnika, ki se uporablja za odkrivanje ravni izražanja ciljnih proteinov. Bis Tris propanski pufer se pogosto uporablja kot pufer za transport beljakovin v poskusih z imunoblotingom.

Med prenosom proteina iz gela na membrano lahko propanski pufer Bis Tris vzdržuje stabilen pH okolja, kar zagotavlja, da se protein prenese na membrano s pravilno konformacijo in stanjem naboja. To je ključnega pomena za kasnejšo vezavo protiteles in zaznavanje signala.

Če so beljakovine podvržene denaturaciji ali konformacijskim spremembam med procesom prenosa, lahko povzroči, da protitelesa ne morejo natančno prepoznati ciljne beljakovine, kar vpliva na točnost eksperimentalnih rezultatov. Zato ima propanski pufer Bis Tris ključno vlogo pri poskusih imunoblotinga, saj pomaga izboljšati občutljivost in zanesljivost poskusov.

Celična kultura je pomembna tehnologija v biomedicinskih raziskavah, pH vrednost medija celične kulture pa pomembno vpliva na celično rast in metabolizem. BIS-TRIS propanski pufer se lahko uporablja za pripravo gojišča celične kulture za vzdrževanje stabilne vrednosti pH med procesom celične kulture.

Različne vrste celic imajo različne zahteve glede pH, vendar na splošno zahtevajo rast v okolju, ki je blizu fiziološkemu pH (približno 7,2-7,4).

Propanski pufer BIS-TRIS lahko ublaži spremembe pH gojišča med celično kulturo, prepreči nihanje pH zaradi kopičenja presnovnih produktov, izmenjave plinov in drugih dejavnikov ter zagotovi stabilno okolje za rast celic. To je zelo pomembno za normalno rast, proliferacijo in funkcionalno izražanje celic, kar pomaga izboljšati stopnjo uspešnosti celične kulture in zanesljivost eksperimentalnih rezultatov.

Elektroforeza nukleinske kisline je pogosto uporabljena metoda za odkrivanje dolžine in koncentracije ciljnih nukleinskih kislin, vključno z elektroforezo DNA in RNA. Primeren za poskuse z elektroforezo nukleinske kisline, lahko vzdržuje stabilnost pH pufra za elektroforezo.

Pri elektroforezi nukleinske kisline se molekule nukleinske kisline selijo pod delovanjem električnega polja glede na njihovo velikost in lastnosti naboja.

Zagotavlja lahko stabilnost pH vrednosti raztopine med elektroforezo, kar omogoča molekulam nukleinske kisline, da migrirajo na pričakovan način, s čimer natančno ločujejo različno dolge fragmente nukleinske kisline in zaznavajo njihove koncentracije. To je zelo pomembno za raziskave, kot so kloniranje genov, analiza izražanja genov in sekvenciranje nukleinskih kislin.

BIS-TRIS se lahko uporablja tudi za odkrivanje kreatin kinaze. Kreatin kinaza je pomemben encim, ki igra ključno vlogo pri metabolizmu mišične energije. Določitev njegove aktivnosti je velikega pomena za diagnosticiranje mišičnih bolezni in vrednotenje športnih poškodb. V poskusu detekcije kreatin kinaze je mogoče vzdrževati stabilnost pH reakcijskega sistema, da zagotovimo, da encim kaže katalitično aktivnost pri optimalnih pogojih pH. Z natančnim nadzorom pH vrednosti je mogoče izboljšati natančnost in zanesljivost merjenja aktivnosti kreatin kinaze, kar zagotavlja močno podporo klinični diagnozi in raziskavam.

BIS-TRIS ima tudi pomembno vlogo pri raziskavah in uporabi hemoglobina. Med postopkom ločevanja hemoglobina je mogoče ohraniti njegovo stabilnost in aktivnost, da se prepreči denaturacija ali agregacija zaradi sprememb pH. To je velikega pomena za čiščenje in strukturne raziskave hemoglobina.

BIS-TRIS lahko učinkovito zaščiti hemoglobin med-postopkom liofilizacije. Sušenje z zamrzovanjem je pogosto uporabljena metoda za konzerviranje bioloških proizvodov, vendar se beljakovine med postopkom zamrzovanja in sušenja lahko poškodujejo. Zagotavlja lahko stabilno okolje za hemoglobin med postopkom liofilizacije, zmanjša denaturacijo in inaktivacijo beljakovin ter izboljša aktivnost in stabilnost hemoglobina po liofilizaciji.

IEF (elektroforeza z izoelektričnim fokusiranjem) in 2-D gel elektroforeza sta pogosti tehniki v raziskavah proteomike, ki se uporabljata za ločevanje in analizo kompleksnih beljakovinskih mešanic. BIS-TRIS se lahko uporablja kot katodni elektrolit za IEF/2-D gelsko elektroforezo.

Med postopkom IEF proteini migrirajo in se fokusirajo v gradientu pH na podlagi njihove izoelektrične točke. Katolit BIS-TRIS lahko vzdržuje stabilnost pH pufra za elektroforezo, kar zagotavlja, da lahko beljakovine med postopkom izoelektričnega fokusiranja natančno migrirajo do svoje izoelektrične točke. Pri 2-D gelski elektroforezi je uporabaMedpomnilnik BIS-TRISprav tako pomaga izboljšati učinek ločevanja in ločevanja proteinov ter zagotavlja visoko{0}}kakovostne podatke za raziskave proteomike.