Peptid gonadorelin acetat

Sinteza tekoče faze postopoma povezuje aminokisline s strategijo zaščitne skupine v raztopini, primerno za sintezo kratkih polipeptidnih verig, ki vsebujejo posebne strukture, kot so disulfidne vezi. Jedro je v zaporedju izbire in odstranjevanja zaščitnih skupin, da se izognete stranskim reakcijam.

Deprotekcija in čiščenje:
Z uporabo TFA za odstranjevanje skupin BOC in piridina za odstranjevanje FMOC skupin smo dobili linearni peptid pirhistrpsertyryleuargproglynh2.
Čiščenje s HPLC in zamrznitvijo - sušenje za pridobitev surovega gonarelina.

Prednosti: natančen nadzor reakcijskih pogojev, primeren za kompleksno sintezo peptidnih verig; Ni potrebe po trdnih faznih nosilcih, kar zmanjšuje stroške.
Omejitve: koraki so okorni in zahtevajo več čiščenje; Reakcijske intermediate je treba očistiti, da se razširi proizvodni cikel.

V določeni študiji je bila uporabljena tekočina - metoda sinteze faze za optimizacijo formule rezalnega reagenta (88% TFA +5% janež sulfid +5% voda {{4}% etadithiol), kar je povečalo donosnost 91,8% in izdelka.

Molekularna formula gonarelina acetata je c ₅₇ h ₇₉ n ₁₇ o ₁₅, z molekulsko maso 1242,36 da. Njegova jedrna struktura je dekapeptidna veriga, sestavljena iz naslednjih sekvenc aminokislin:

5-Oxopropyl-L-Histoyl-L-tryptophan-L-tryptophan-L-tryptophan{{1 0}}L-tyrosyl-glycyl-L-leucyl-L-arginil-L-prolyl-glycinamide.
V tej strukturi prvi 5 - oksoprolin (piroglutaminska kislina) tvori ciklično strukturo, kar povečuje molekularno stabilnost; Glicin (gly) na položaju 6 in glicinamid (gly - nh ₂) na položaju 10 so fleksibilni segmenti, ki molekulo obdajo s konformacijsko prilagodljivostjo; Tretji triptofan (TRP) in peti tirozin (TYR) vsebujeta aromatične obroče in lahko sodelujeta v medmolekularnih interakcijah z π - π zlaganjem.
Uvedba acetatne oblike (CH3 COO ⁻) ne samo poveča topnost zdravila (z vodotopnostjo do 25 mg/ml), ampak se tudi veže na amino ali karboksilne skupine verige skozi ionske vezi, ki tvori stabilno strukturo soli in zmanjša tveganje za razgradnjo peptida med skladiščenjem.

Sposobnost hidroksilnih, amino, karboksilnih skupin, da tvorijo vodikove vezi z molekulami vode, zahteva skladiščenje v suhem okolju, da se izognemo združevanju ali razgradnji.
Topnost:
Ta spojina ima visoko topnost v vodi (25 mg/ml), v metanolu je rahlo topna in se lahko popolnoma raztopi v 1% raztopini ocetne kisline. Na njegovo topnost pomembno vpliva pH: v kislih pogojih (na primer 1% ocetna kislina) karboksilna protonacija zmanjša intermolekularno elektrostatično odbojnost in spodbuja raztapljanje; V nevtralnem ali alkalnem okolju lahko deprotonacija karboksilnih skupin sproži medmolekularno agregacijo, kar vodi do zmanjšanja topnosti.

Tališča in toplotna stabilnost:
Eksperimentalni podatki kažejo, da je tališče višja od 155 stopinj C (razgradnja), kar kaže na močno toplotno stabilnost. Vendar lahko visoke temperature povzročijo hidrolizo peptidne vezi ali oksidacijo stranske verige aminokislin, zato je treba dejansko shranjevanje nadzorovati v območju od -20 stopinj C do 8 stopinj C, da se razgradi.

Spektralne značilnosti:
UV absorpcijski spekter kaže največji absorpcijski vrh pri 278 nm, kar ustreza aromatičnemu obročnemu konjugiranemu sistemu triptofana in tirozina. To funkcijo lahko uporabimo za kvantitativno analizo (na primer spektrofotometrično določanje vsebine) ali za primerjavo čistosti z referenčnimi standardi s pomočjo tanke plasti kromatografije (TLC).

Hidrolitna stabilnost
Razmeroma stabilen v kislih ali nevtralnih pogojih, vendar je nagnjena k hidrolizi peptidne vezi v alkalnem okolju. Na primer, pod delovanjem močnih baz (na primer NaOH) se lahko peptidna vez med 6. glicinom in 7. levcinom zlomi, kar ustvari kratke fragmente peptida. Poleg tega je indolni obroč tretjega triptofana nagnjen k odprtju obroča pod lahkimi ali oksidativnimi pogoji, kar vodi do izgube aktivnosti zdravil.

V prisotnosti kisika ali prostih radikalov lahko te funkcionalne skupine podvržejo oksidacijskim reakcijam, ki ustvarijo perokside ali hidroksilne derivate, kar posledično sproži razgradnjo verige. Zato se formulacijam pogosto dodajajo antioksidanti (kot je vitamin C), da se poveča stabilnost.

Svetlobna stabilnost
Občutljivost na svetlobo, zlasti ultravijolično svetlobo (200-400 nm), lahko neposredno moti konjugiran sistem triptofana ali posredno sproži oksidativno razgradnjo z nastajanjem prostih radikalov. Klinične injekcije je treba pakirati v rjave steklene steklenice in jih shraniti stran od svetlobe.

Aktivnost vezave receptorjev
Z vezavo z visoko afiniteto na receptor GnRH v sprednji hipofizi skozi deset strukture se sproži znotrajcelična signalizacija (kot je pot cAMP/PKA), kar vodi do sproščanja gonadotropinov (FSH, LH). Njegova vezavna aktivnost je odvisna od:
Komplementarnost med ciklično strukturo prvega 5-oksoprolina in receptorskega žepa;
Π - π interakcija med aromatičnim obročem tretjega triptofana in hidrofobnim območjem receptorja;
Pozitiven naboj 8. arginina je elektrostatično privlačen za kisli ostanek receptorja.

Dvofazni mehanizem
Ko ga kratkoročno nenehno dajemo, spodbudi sproščanje FSH/LH iz hipofize in poveča raven spolnih hormonov; Dolgoročna uporaba vodi do zaviranja izločanja FSH/LH zaradi desenzibilizacije receptorjev, kar na koncu zmanjša spolne hormone na ravni kastracije. Ta značilnost je alternativa kirurški kastraciji pri zdravljenju raka prostate, hkrati pa zmanjša tveganje za kirurške zaplete.

Polimorfni produkti razgradnje:
Med presnovnim procesom v telesu se lahko z encimsko hidrolizo (kot je delovanje peptidaze) ali ne encimske razgradnje (kot je oksidacija) ustvarijo različni presnovki. Na primer, 6. glicin se lahko hidrolizira, da ustvari devet peptidnih fragmenta; Oksidacija triptofana v tretjem položaju ustvarja hidroksilne derivate. Aktivnost teh presnovkov je treba prepoznati z masno spektrometrijo (LC - MS) ali jedrsko magnetno resonanco (NMR) za oceno njihove varnosti.
Interakcije z zdravili:
Ko se uporablja v kombinaciji z zdravili, ki vsebujejo kovinske ione (na primer nekatere antibiotike), topnost ali aktivnostpeptid gonadorelin acetatse lahko zmanjša zaradi kelacije. Poleg tega se lahko njegova kisla oblika soli podvrže nevtralizacijskim reakcijam z alkalnimi zdravili (kot so antihistaminiki), zato se je treba izogniti mešanim injekcijam.