Glavna komponentaIGF 1 LR3 sprejje IGF-1 LR3 (dolgi R3 insulinu podoben rastni faktor-1), gensko spremenjen analog insulinu podobnega rastnega faktorja-1 (IGF-1). Lahko obrne izgubo mišic z zaviranjem razgradnje beljakovin in spodbujanjem mišične sinteze, vendar je trenutno omejeno na predklinične študije. Poskusi na živalih so pokazali, da lahko IGF-1 LR3 izboljša strukturo mišičnih vlaken, vendar poskusi na ljudeh še niso bili izvedeni. Nevrotrofni učinek IGF-1 LR3 lahko spodbuja regeneracijo aksonov in preživetje nevronov, vendar je treba njegovo sposobnost, da prodre skozi krvno-možgansko pregrado, dodatno potrditi. Pospešuje celjenje ran s spodbujanjem proliferacije fibroblastov, vendar je potrebna previdnost zaradi nevarnosti hipoglikemije.
|
|
|
IGF 1 LR3 COA
Modifikacije surovin in genskega inženiringa
ključne tehnologije izdelkov
Izvor gena in izbira gostitelja
IGF 1 LR3 sprejse proizvaja s tehnologijo genske rekombinacije, njegovo gensko zaporedje pa je spremenjeno na podlagi človeškega insulinu-podobnega rastnega faktorja-1 (IGF-1). Gostitelj za ekspresijo je običajno izbran med Escherichia coli (kot so sevi COH) ali celicami sesalcev (kot so celice CHO), med katerimi se sistem E. coli pogosto uporablja zaradi visoke učinkovitosti in nizkih stroškov pri fermentaciji z visoko gostoto.
Modifikacija aminokislinskega zaporedja
Mutacija R3: Tretja aminokislina naravnega IGF-1 je glutaminska kislina (Glu), ki jo nadomesti arginin (Arg) z IGF-1 LR3, ki tvori marker "R3". Ta mutacija bistveno zmanjša njegovo afiniteto za inzulinu podobne vezavne beljakovine rastnega faktorja (IGFBP), poveča njegovo prosto koncentracijo za več kot 1000-krat in poveča njegovo biološko aktivnost za 2-3 krat.
N-terminalni podaljšek: dodajte 13 aminokislinskih ostankov na koncu verige B, da oblikujete verižno strukturo 83 aminokislin (nekatera literatura omenja 93 aminokislin, kar je lahko posledica razlik v postopkih čiščenja ali metodah odkrivanja), kar dodatno optimizira njeno delovanje.
Postopek fermentacije in čiščenja
proces fermentacije
Fermentacija z visoko gostoto: izražanje Escherichie coli povzroči toplotni šok pri 42 stopinjah, fermentacijska posoda pa lahko doseže kapaciteto 50 L. Ciljne beljakovine predstavljajo 30-40 % vseh bakterijskih beljakovin.
Optimizacija gojišča kulture: nadzor kopičenja presnovnih stranskih produktov (kot je ocetna kislina) in izboljšanje čistosti proizvoda s strategijo šaržnega gojenja.
Postopek čiščenja
Groba in čista faza:
Ionska izmenjevalna kromatografija: uporaba ločevanja razlike v naboju beljakovin za povečanje čistosti na več kot 90 %.
Hidrofobna interakcijska kromatografija: dodatno odstrani nečistoče in doseže čistost nad 95 %.
Čista faza:
Molekularna izključitvena kromatografija (SEC-HPLC): ločite ciljne proteine od dimerov ali oligomerov s čistostjo večjo ali enako 95 % (zaznano s SDS-PAGE).
Koncentracija ultrafiltracije: koncentrirajte beljakovine s tehnologijo filtracije s tangencialnim tokom, medtem ko pufer zamenjate s sistemom PBS (pH 7,4).
Končna filtracija: za sterilizacijo uporabite filtrirno membrano 0,22 μm, da zagotovite sterilnost.
nadzor kakovosti
Preverjanje aktivnosti: Biološko aktivnost smo izmerili s testom proliferacije brez seruma MCF-7 človeških rakavih celic dojke, vrednost ED50 pa je bila manjša ali enaka 1,5 ng/mL.
Testiranje čistosti: SDS-PAGE in SEC-HPLC kombinirana detekcija, čistost Večja ali enaka 95 %.
Nadzor nečistoč: vsebnost endotoksina manj kot ali enaka 10 EU/mg, ostanek gostiteljske beljakovine manjši ali enak 0,005 %, eksogeni ostanek DNA manj kot ali enak 10 ng/mg.
Postopek priprave in stabilnost
Zaščitna formula za sušenje z zamrzovanjem
Z uporabo 8 % trehaloze ali 5 % manitola kot zaščitnih-zaščitnih sredstev pri liofiliziranju v kombinaciji z 0,01 % Tween 80 (solubilizator) se tekoče beljakovine s tehnologijo liofilizira-sušenja pretvorijo v bel prah z vsebnostjo vlage manj kot 3 %.
Garancija stabilnosti
Dolgotrajno skladiščenje
Zamrznjeno posušen prašek lahko shranjujete 36 mesecev pri -20 stopinjah do -80 stopinjah, po rekonstituciji pa ga lahko postavite v sterilne pogoje pri -20 stopinjah do -80 stopinj za 6 mesecev in pri 2 stopinjah do 8 stopinj za 7-10 dni.
Pogoji prevoza: paketi modrega ledu so za prevoz shranjeni v hladilniku, pri čemer je zagotovljeno vzdrževanje temperature 2-8 stopinj in izogibanje ponavljajočemu se zamrzovanju in odmrzovanju.
Proizvodna oprema in skladnost z GMP
Osnovna oprema
Fermentacijski sistem: 50L popolnoma avtomatska fermentacijska posoda (opremljena s pH, raztopljenim kisikom, spletnim sistemom za spremljanje temperature).
Sistem čiščenja: čistilec beljakovin AKTA Avant (podpira avtomatizirano kromatografsko ločevanje).
Oprema za pripravo: Mini Spray Dryer B-290 (spray sušilnik) ali liofilizator (za pripravo prahu).
Analitični instrumenti: HPLC-MS (potrditev molekulske mase), dinamični analizator sipanja svetlobe (zaznavanje porazdelitve velikosti delcev), encimsko{1}}imunosorbentni test (ELISA).
Skladnost z GMP
Proizvodno okolje je v skladu z "Dobro proizvodno prakso za zdravila (revidirano leta 2010)" in strogo nadzoruje indikatorje, kot so bakterijski endotoksini in ostanki gostiteljskih beljakovin.
Zagotovite popolno dokumentacijo o kakovosti, vključno s potrdilom o kakovosti (COA), varnostnim listom (MSDS) in regulativnimi podpornimi dokumenti.
IGF 1 LR3 Spray izkrivlja presnovni fenotip in funkcionalno diferenciacijo glialnih celic
IGF 1 LR3 sprejje pripravek, ki vsebuje komponento IGF-1 LR3, ki je umetno modificiran dolgo{3}}delujoči inzulinu-podoben rastni faktor. Ima večjo aktivnost kot naravni IGF-1, daljšo razpolovno dobo v telesu in boljše učinke spodbujanja rasti, kar lahko spodbuja delitev, migracijo in diferenciacijo večine celic. Na področju medicine je bil IGF-1 LR3 deležen široke pozornosti zaradi svojih edinstvenih bioloških značilnosti in so ga proučevali za raziskovanje terapevtskega potenciala različnih bolezni.
Glialne celice so pomembna sestavina centralnega živčnega sistema, vključno z mikroglijo, astrociti in drugimi. Imajo nepogrešljivo vlogo pri ohranjanju normalnega delovanja živčnega sistema, podpirajo preživetje nevronov in sodelujejo pri imunskih odzivih. Presnovni fenotip in funkcionalni status glialnih celic sta tesno povezana z zdravjem živčnega sistema in vsi dejavniki, ki vplivajo na njihovo presnovo in delovanje, lahko pomembno vplivajo na živčni sistem.
Metabolični fenotip in delovanje glialnih celic
Vrste in porazdelitev glialnih celic
Glialne celice v centralnem živčnem sistemu vključujejo predvsem mikroglijo in astrocite. Mikroglije so imunske celice v centralnem živčnem sistemu, široko porazdeljene po možganih in hrbtenjači. Delujejo kot "varuhi" živčnega sistema, nenehno spremljajo spremembe v okoliškem okolju in igrajo ključno vlogo pri vzdrževanju imunske homeostaze živčnega sistema. Astrociti so najpogostejši tip glialnih celic v centralnem živčnem sistemu, ki imajo različne oblike in funkcije. Astrociti s svojimi procesi tvorijo tesne povezave z nevroni, krvnimi žilami itd., sodelujejo pri tvorbi krvno-možganske pregrade, zagotavljajo prehransko podporo nevronom, uravnavajo privzem in presnovo nevrotransmiterjev ter pomembno vplivajo na normalno delovanje nevronov in prenos živčnih signalov.
Metabolični fenotip normalnih glialnih celic
V normalnih fizioloških pogojih imajo glialne celice specifične presnovne fenotipe. Mikroglija opravlja funkcije imunskega nadzora v stanju mirovanja, njihova presnovna aktivnost pa je razmeroma nizka, v glavnem se zanaša na poti oksidativne fosforilacije za pridobivanje energije. Ko jih spodbudi invazija patogenov, poškodba tkiva itd., se mikroglija aktivira in njihov presnovni fenotip je podvržen pomembnim spremembam, pri čemer se premakne v presnovni način, v katerem prevladuje glikoliza, ki hitro proizvaja energijo in bioaktivne molekule za spopadanje z zunanjimi izzivi. V normalnih okoliščinah je presnovna aktivnost astrocitov prilagojena presnovnim potrebam nevronov. Sebi in nevronom zagotavljajo energijsko podporo z aerobno oksidacijo z zaužitjem glukoze. Hkrati astrociti sodelujejo tudi v ciklu glutamata in glutamina, ki pretvarjajo glutamat, ki ga sproščajo nevroni, v glutamin in ga prenašajo nazaj v nevrone, da ponovno sintetizirajo glutamat. Ta proces je ključnega pomena za vzdrževanje ravnovesja nevrotransmiterjev in normalnega delovanja nevronov.
Funkcije glialnih celic
Glialne celice imajo več pomembnih funkcij v centralnem živčnem sistemu. Kot imunske celice lahko mikroglija prepozna in odstrani patogene, poškodovane celice in nenormalne beljakovinske agregate ter sodeluje pri uravnavanju nevroinflamatornih odzivov. Med nevronskim razvojem mikroglija sodeluje tudi pri sinaptičnem obrezovanju in pomaga oblikovati normalne povezave nevronskih vezij.
Funkcije astrocitov so obsežnejše. Ne zagotavljajo samo prehranske in strukturne podpore za nevrone, ampak sodelujejo tudi pri uravnavanju sproščanja in privzema nevrotransmiterjev ter ohranjajo homeostazo nevrotransmiterjev. Poleg tega astrociti uravnavajo možganski pretok krvi in sodelujejo pri ohranjanju delovanja krvno{2}}možganske pregrade z interakcijo s krvnimi žilami, ki ščitijo živčni sistem pred škodljivimi snovmi na periferiji.
Učinek pršila IGF-1 LR3 na popačen presnovni fenotip glialnih celic
Spremembe presnovnih poti
IGF-1 LR3 v pršilu IGF-1 LR3 lahko aktivira spodnje signalne poti z vezavo na receptorje IGF-1 na površini celic glije in tako vpliva na presnovne poti celic glije. Kar zadeva presnovo energije, lahko aktivacija signalne poti IGF-1 spodbudi prehod glialnih celic iz oksidativne fosforilacije v glikolizo. V normalnih okoliščinah je oksidativna fosforilacija glavni način, da celice proizvajajo energijo, z visoko učinkovitostjo, vendar relativno nizko; Čeprav glikoliza proizvede manj energije, lahko hitro zagotovi energijo v kratkem času.
Ko IGF-1 LR3 deluje na glialne celice, lahko poveča ekspresijo glikolitičnih encimov in poveča glikolitično aktivnost z aktiviranjem signalnih poti, kot sta PI3K/Akt in Ras/MAPK. Sprememba te presnovne poti lahko vodi do "izkrivljanja" v načinu oskrbe z energijo glialnih celic, kar ima za posledico nenormalno regulacijo energetske presnove, ko se soočamo z različnimi fiziološkimi ali patološkimi stanji.
Priljubljena oznake: igf 1 lr3 sprej, dobavitelji, proizvajalci, tovarna, veleprodaja, nakup, cena, razsuto, naprodaj