Tiazolil modra CAS 298-93-1

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. je eden najbolj izkušenih proizvajalcev in dobaviteljev tiazolil modrega cas 298-93-1 na Kitajskem. Dobrodošli v veleprodajni visokokakovostni tiazolil modri cas 298-93-1, ki je naprodaj tukaj iz naše tovarne. Na voljo sta dobra storitev in razumna cena.

Tiazolil modra, bolj znan kot MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolijev bromid), skriva fascinantno dvojnost – je hkrati ključno orodje v celični biologiji in kameleonska kemična nenavadnost. Ta rumeni kristalinični prah je v živih celicah podvržen osupljivi metamorfozi: mitohondrijske reduktaze razcepijo njegov tetrazolijev obroč in ga spremenijo v netopno vijolično oborino formazana – reakcija, ki je tako vizualno osupljiva, da je postala zlati standard za merjenje sposobnosti preživetja celic. Vendar onkraj laboratorijske klopi MTT razkriva bolj ezoterična vedenja; njegova kristalna struktura pod mikroskopom tvori nenavadne vzorce "ribje kosti", medtem ko mu njegove redoks lastnosti omogočajo sodelovanje v eksotičnih fotokemičnih reakcijah, ko je izpostavljen določenim valovnih dolžinah svetlobe. Zanimivo je, da spojina izkazuje redek pojav, imenovan "metakromazija" - pojavljanje različnih barv glede na koncentracijo in molekularno okolje - lastnost, ki so jo nekoč izkoriščali tekstilni kemiki za ustvarjanje "pametnih" barvil. Nedavne študije so odkrile njegovo nepričakovano vlogo kot šibkega zaviralca nekaterih encimov dihalne verige, kar namiguje, da je ta vseprisotni testni reagent morda subtilno vplival na presnovne procese, ki jih znanstveniki uporabljajo za preučevanje. Ko so raztopine MTT raztopljene v organskih topilih, kažejo nenavaden učinek dušenja fluorescence, ki je zmedel fizikalne kemike, kar kaže na kompleksne medmolekularne interakcije, ki še čakajo na popolno razlago.

Tiazolil modraKemijsko ime je 3-(4,5-dimetil-2-tiazol) -2,5-difeniltetrazolijev bromid, skrajšano kot MTT, ki je pomembna organska spojina. Odkar je Mosman leta 1983 prvič poročal o uporabi barvanja z MTT za določanje rasti in preživetja celic, se MTT pogosto uporablja na področjih, kot so znanosti o življenju, medicinske raziskave in razvoj zdravil. Sledi podrobna razlaga njegovega namena:

Uporaba v raziskavah celične biologije

 

MTT je ena izmed klasičnih metod za določanje celične proliferacije. Med celično kulturo lahko dehidrogenaze, kot je sukcinat dehidrogenaza v živih celičnih mitohondrijih, reducirajo eksogeni MTT v netopni modro vijoličen kristalni formazan, ki se odloži v celici. Mrtve celice nimajo te redukcijske sposobnosti in zato ne proizvajajo formazana. Z raztapljanjem formazana v celicah in merjenjem njegove vrednosti absorpcije svetlobe pri določenih valovnih dolžinah (kot je 490 nm ali 562 nm) z uporabo čitalnika-imunosorbentnega testa (ELISA) se lahko posredno odraža število živih celic. Znotraj določenega razpona števila celic je količina nastalih kristalov MTT sorazmerna s številom celic, zato je na podlagi izmerjene vrednosti absorbance (vrednost OD) mogoče določiti celično proliferacijo.

Uporaba v raziskavah celične biologije

 

MTT se lahko uporablja tudi za določanje toksičnosti zdravil ali drugih metod zdravljenja (kot je obsevanje s sevanjem) na gojenih celicah in vitro. S primerjavo vrednosti OD terapevtske in kontrolne skupine je mogoče oceniti učinek zdravil ali metod zdravljenja na celično aktivnost. Večja kot je vrednost OD, močnejša je celična aktivnost; Nasprotno, kaže, da čim šibkejša je celična aktivnost oziroma večja je celična toksičnost. Ta metoda ima široko uporabo pri presejanju zdravil, toksikoloških raziskavah in na drugih področjih. Čeprav se MTT uporablja predvsem za merjenje celične proliferacije in citotoksičnosti, se lahko v nekaterih primerih uporablja tudi za pomoč pri študiju celične apoptoze. Med procesom celične apoptoze se encimska aktivnost znotraj celice spremeni, kar lahko vpliva na redukcijsko sposobnost MTT. S primerjavo razlike v vrednostih OD med apoptotičnimi celicami in normalnimi celicami lahko predhodno ugotovimo pojav celične apoptoze. Vendar je treba opozoriti, da MTT ni specializirana metoda za odkrivanje celične apoptoze, zato je treba njene rezultate celovito analizirati v povezavi z drugimi metodami odkrivanja apoptoze.

Uporaba pri razvoju zdravil

 

V procesu razvoja zdravil je test MTT pogosto uporabljena visokozmogljiva-metoda presejanja zdravil. S soinkubacijo preskusnega zdravila s celicami in uporabo testa MTT za merjenje sprememb celične aktivnosti je mogoče hitro pregledati potencialne aktivne molekule zdravila. Ta metoda ima prednosti enostavnega delovanja, zanesljivih rezultatov in visoke zmogljivosti ter ima pomembno uporabniško vrednost v zgodnji fazi razvoja zdravil. Test MTT se lahko uporablja tudi za preučevanje mehanizma delovanja zdravil. S primerjavo sprememb celične aktivnosti v različnih pogojih zdravljenja z zdravili je mogoče predhodno določiti vpliv zdravil na procese, kot sta celična proliferacija in apoptoza. S kombiniranjem drugih tehnik molekularne biologije, kot sta Western blot in pretočna citometrija, je mogoče dodatno razkriti tarče in signalne poti zdravil. Pri vrednotenju varnosti zdravil se lahko test MTT uporabi za oceno toksičnih učinkov zdravil na celice. Z merjenjem sprememb vrednosti OD celic po zdravljenju z zdravilom je mogoče ugotoviti, ali ima zdravilo citotoksičnost in moč toksičnosti. To je zelo pomembno za usmerjanje predkliničnih raziskav in klinične uporabe zdravil.

Uporaba MTT na drugih področjih

 

V imunoloških raziskavah lahko z MTT testom določimo proliferacijsko sposobnost limfocitov. S sočasno inkubacijo limfocitov z antigeni ali imunostimulansi in merjenjem sprememb celične aktivnosti z uporabo testa MTT je mogoče oceniti sposobnost imunskega odziva limfocitov. Ta metoda ima široko uporabo pri razvoju cepiv, imunoterapiji in na drugih področjih. V onkoloških raziskavah se lahko test MTT uporablja za določanje aktivnosti proliferacije in občutljivosti tumorskih celic na zdravila. S primerjavo sprememb vrednosti OD tumorskih celic pod različnimi pogoji zdravljenja z zdravili je mogoče pregledati molekule zdravil z zaviralnimi učinki na tumorske celice in ovrednotiti njihove proti-tumorske učinke. To je zelo pomembno za usmerjanje kliničnega zdravljenja tumorjev. V okoljskih toksikoloških raziskavah se lahko test MTT uporabi za oceno toksičnih učinkov okoljskih onesnaževal na celice. S sočasno inkubacijo celic z različnimi koncentracijami onesnaževal in merjenjem sprememb celične aktivnosti z uporabo MTT testa je mogoče določiti toksičnost in mehanizem delovanja onesnaževal. To je zelo pomembno za oceno ekoloških tveganj onesnaževal okolja in oblikovanje politik varstva okolja. 

Eksperimentalni korakitiazolil modrometoda:

1: Tripsin razgradi celice v logaritemski fazi, centrifugira in jih po prekinitvi zbere, da naredi celično suspenzijo, in prilagodi svojo koncentracijo na 5-10 s številom celic × 104/ml. Za začetnike je treba doseči, da celice dosežejo 5-10 × 104/ml, pogosto ne vedo, kje začeti. Tukaj sem, da vam ponudim preprosto metodo za začetno določitev števila celic.

Za primer vzemite 25 cm2, ki se običajno uporablja za celično kulturo:

1) Gostota celic je približno 80%~90% (spodnja slika prikazuje približno stanje celic pri gostoti 80%~90%). Po razklopu in centrifugiranju odstranite supernatant in dodajte 3 ml medija za mešanje.

2) Vzemite novo 15 ml sterilno centrifugirno epruveto (za naslednji korak inokulacije plošče s 96 vdolbinicami) in jo napolnite s približno 9 ml medija

3) Vzemite 1 ml iz 3 ml celične suspenzije, pripravljene v prvem koraku, jo dodajte v zgornjo epruveto in po mešanju preštejte celice. V tem času je na splošno 5-10 ali manj × 104/ml, kar je enako 5-10 celic na celico v 4 celicah plošče za štetje celic (glejte spodnjo sliko); Če koncentracija ni zadostna, je treba celično suspenzijo dodati glede na rezultat štetja in vsako kapljico izračunati kot 50 ul.

4) Število celic je treba prilagoditi glede na različne namene poskusa. Na primer, v splošnem poskusu celične proliferacije je mogoče uporabiti 2000 celic na vdolbinico (kar ustreza gostoti celične suspenzije 2 × 104/ml), 5000 do 10000 celic na vdolbinico (ekvivalentno gostoti celične suspenzije 5 × 104/ml). Poleg tega je treba število celic določiti tudi glede na njihove značilnosti, kot je hitrost rasti. Na primer, gostota celic, ki rastejo hitreje, je lahko nekoliko manjša.

2. Ko pripravite celično suspenzijo, jo nežno premešajte in dodajte 100 ul v vsako luknjo, tako da bo gostota celic, ki jih želite testirati, 5000-10000/luknjico (obrobna luknjica je napolnjena s sterilnim PBS).

L Opomba: ker se bodo celice po mešanju še naprej usedale, je treba med postopkom inokulacije večkrat mešati, na primer enkrat na vsakih šest lukenj, da zagotovite, da je gostota celic inokulacije popolnoma enaka med luknjami, kar je ključnega pomena za rezultate MTT.

3. Ploščo z inokulirano celično kulturo postavite v inkubator za gojenje, dokler celična monoplast ni prekrita z dnom luknje (ravna plošča s 96 luknjami), in dodajte zdravilo z gradientom koncentracije. Načeloma lahko zdravilo dodamo po tem, ko je celica pritrjena na steno, ali dve uri ali pol dneva, pogosto pa dodajamo zdravilo popoldan prejšnjega dne in naslednje jutro. Na splošno je nastavljenih 5-7 gradientov, 100 ul na luknjo in 3-5 več lukenj. Priporočljivo je, da nastavite 6, sicer je težko odražati dejansko stanje. Naslednjo sliko lahko uporabite kot referenčni korak za ploščo s 96 luknjami.

L Za odmerjanje nekateri ljudje neposredno dodajajo zdravila v plošče s 96 vdolbinicami v različnih volumnih, da tvorijo koncentracijski gradient. Ampak mislim, da bi morali poskusiti zmešati različne koncentracije zdravil v epruveti EP, nato odstraniti supernatant kulture iz plošče s 96 vdolbinicami (ki ga je mogoče posesati s pištolo za praznjenje) in dodati 100 ul gojišča kulture, ki vsebuje različne koncentracije zdravil, kar lahko zagotovi natančnost koncentracije zdravila. Poleg tega je treba upoštevati, da če uporabljate to metodo, ne posesajte vse raztopine kulture s plošče s 96 vdolbinicami, preden dodate zdravilo. Vzorce morate dodati takoj po posesanju dela, da preprečite smrt celic zaradi sušenja plošče s 96 vdolbinicami.

Inkubirajte s 4,5 % CO2 pri 37 stopinjah 16-48 ur in opazujte učinek zdravila pod invertnim mikroskopom. Naslednja slika prikazuje tipični gradient citotoksičnosti zdravila.

4. V vsako vdolbinico dodajte 10 ul raztopine MTT (5 mg/ml, tj. . 0.5 % MTT) in nadaljujte s kulturo 4 ure. Če lahko zdravilo reagira ztiazolil modroraztopino kulture lahko po centrifugiranju zavržete, raztopino kulture, ki vsebuje MTT, pa lahko dodate po 2-3-kratnem izpiranju s PBS.

5. Ustavite kulturo in se pripravite na raztapljanje in kristalizacijo.

Tiazolil modra, katerega kitajsko ime je metilno modro, je pomembna organska spojina, ki se pogosto uporablja v medicini, biologiji in kemiji. v medicini se pogosto uporablja za zdravljenje zastrupitve z nitriti, zastrupitve s cianidom itd., uporablja pa se tudi pri diagnostiki in pomožnem zdravljenju nekaterih bolezni; v bioloških raziskavah se lahko uporablja kot barvilo za označevanje celic ali tkiv. Vendar ima lahko, tako kot mnoga druga zdravila, tudi metilensko modro med uporabo vrsto stranskih učinkov:

Stranski učinki prebavnega sistema

Slabost in bruhanje sta eden od pogostih neželenih učinkov metilenskega modrega v prebavnem sistemu. Ko metilensko modro vstopi v telo, lahko stimulira sluznico prebavil, kar povzroči slabost in v hujših primerih celo bruhanje. Ta simptom je bolj izrazit, če je hitrost intravenskega injiciranja prehitra ali je odmerek prevelik. Na primer, v nekaterih kliničnih primerih lahko bolniki kmalu po hitri intravenski injekciji metilenskega modrega občutijo znatno slabost in bruhanje, kar vpliva na njihovo udobje in izkušnjo zdravljenja. Nekateri bolniki lahko občutijo bolečine v trebuhu po uporabi metilenskega modrega, stopnja bolečine pa se lahko razlikuje glede na individualne razlike in sega od blagega neugodja do hujše bolečine.

Hkrati ga lahko spremlja tudi driska, ki je lahko posledica vpliva metilenskega modrega na črevesno peristaltiko in prebavno funkcijo, kar vodi do nenormalnega gibanja črevesja in sprememb v izločanju prebavne tekočine. Dolgotrajno ali pogosto pojavljanje bolečin v trebuhu in driske ne vpliva le na bolnikovo absorpcijo hranil in fizično zdravje, ampak lahko povzroči tudi druge zaplete.

Neželeni učinki urinskega sistema

Po uporabi metilenskega modrega se urin obarva modro, kar je posledica izločanja metilenskega modrila in njegovih metabolitov v urin preko ledvic. Na splošno je ta sprememba barve urina začasna in ne bo resno vplivala na telesno zdravje. Toda v nekaterih posebnih primerih, na primer pri bolnikih z boleznimi sečil, lahko spremembe barve urina motijo ​​diagnozo bolezni, zato morajo zdravniki opraviti celovito analizo na podlagi drugih kazalcev pregleda. Med uriniranjem lahko nekateri bolniki čutijo pekoč občutek na odprtini sečnice.

 

To je lahko posledica stimulativnega učinka metilenskega modrega na sluznico sečnice, še posebej, ko je koncentracija urina visoka ali se med uriniranjem drgne sluznica sečnice, bo pekoč občutek bolj izrazit. Ta simptom lahko povzroči določeno nelagodje bolnikom in vpliva na njihovo vsakdanje življenje.

Nevrološki neželeni učinki

Omotičnost in glavobol sta pogosta nevrološka stranska učinka metilenskega modrega. Po uporabi metilenskega modrega lahko bolniki občutijo omotico in dezorientacijo v glavi ali občutijo nelagodje, kot sta otekanje in bolečina v glavi. Ta simptom lahko vpliva na bolnikovo pozornost in sposobnost razmišljanja ter zmanjša delovno in življenjsko učinkovitost. Pojav vrtoglavice in glavobola je lahko povezan z učinki metilenskega modrega na možganske krvne žile in živce, poseben mehanizem pa je treba še dodatno raziskati. V redkih primerih lahko metilensko modro povzroči motnje zavesti, kot so zaspanost, koma itd.

To je običajno posledica pretirane uporabe metilenskega modrega ali pacientov, ki so preveč občutljivi na zdravilo, kar povzroči resno zaviranje centralnega živčnega sistema. Motnje zavesti so resen stranski učinek, ki lahko ogrozi bolnikovo življenjsko varnost in zahteva takojšnje reševalno zdravljenje.

1. Kakšna je uporaba tiazolil modrega tetrazolijevega bromida?

Tiazolil modra Tetrazolij modra (MTT) se lahko uporablja za merjenje celične proliferacije. MTT proizvaja rumenkasto raztopino, ki jo mitohondrijske dehidrogenaze živih celic pretvorijo v temno moder, v vodi-netopen MTT formazan.

2. Ali je Thiazolyl Blue varno za shranjevanje?

Temperaturni pogoji: prašek zaprite in ga shranite v hladilniku pri -20 stopinjah za zamrzovanje, kar lahko učinkovito podaljša rok uporabnosti (običajno 1–2 leti); za kratkotrajno skladiščenje (v 1 mesecu) ga lahko začasno hranimo pri 4 stopinjah hlajenja.

Zahteve za -odpornost na svetlobo in vlago-: prah MTT je-občutljiv na svetlobo in ga je treba hraniti v rjavih reagentnih steklenicah ali prozornih steklenicah, ovitih s kositrno folijo. Medtem je treba dodati sušilna sredstva (npr. silikagel), da preprečite, da bi prašek absorbiral vlago in se strdil.

3. Ali se bo barva Thiazolyl Blue spremenila?

Ko raztopina pokaže modro vijolično oborino ali potemni, to pomeni, da je bila oksidirana in je ni več mogoče uporabljati.
Izogibajte se postavljanju raztopine na sobno temperaturo ali v svetlobno okolje, saj lahko hitro pokvari.

Priljubljena oznake: tiazolil modra cas 298-93-1, dobavitelji, proizvajalci, tovarna, veleprodaja, nakup, cena, razsuto, za prodajo