IGF 1 LR3 tableta

Glavna komponentaIGF 1 LR3 tableta, IGF-1 LR3 (Long R3-IGF-1), je umetno sintetiziran inzulinu podoben analog rastnega faktorja-1, ki se običajno uporablja v znanstvenih raziskavah ali posebnih zdravstvenih okoljih v obliki injekcij. Je enoverižni alkalni polipeptid, sestavljen iz 70 aminokislin, ki jih večinoma sintetizirajo jetra in uravnava rastni hormon (GH). Njegova zgradba je podobna insulinu, vendar je njegova aktivnost pospeševanja rasti veliko večja od insulina. Aktivira spodnje signalne poti (kot sta AKT in MAPK) z vezavo na receptorje tipa tirozin kinaze (IGF-1R), s čimer spodbuja celično proliferacijo, diferenciacijo in presnovno regulacijo. Kot rastni dodatek IGF-1 LR3 bistveno poveča stopnjo proliferacije in proizvodnjo rekombinantnih beljakovin HEK293, CHO in drugih celic ter se pogosto uporablja v biofarmacevtski industriji. V modelih transgenih miši se LR3 uporablja za preučevanje razvoja mišic, presnovne regulacije in mehanizmov staranja. Na primer, dolgotrajno injiciranje LR3 lahko upočasni atrofijo mišic in izboljša motorično sposobnost starejših miši.

IGF 1 LR3 COA

IGF-1 LR3 (dolgoverižni humani insulinu podoben rastni faktor) je zelo aktiven peptid, ki je bil umetno spremenjen. S spreminjanjem zaporedja aminokislin, ki temelji na človeškem IGF-1, znatno poveča biološko stabilnost in aktivnost ter ima pomembno uporabno vrednost na področjih, kot so biomedicinske raziskave in razvoj, celične kulture itd.IGF 1 LR3 tableta(dolgo{0}}človeški insulin-kot tablete rastnega faktorja) je kompleksen sistemski inženiring, ki združuje več področij tehnologije, kot so genski inženiring, postopki formulacije in nadzor kakovosti

Proizvodni proces tablet IGF-1 LR3 lahko razdelimo na tri glavne faze: priprava surovine, oblikovanje formulacije, oblaganje in pakiranje. Vsaka stopnja vključuje več finih kemičnih procesov in zahteva strogo kontrolo procesnih parametrov, da se zagotovi enakomerna kakovost izdelka.

Priprava surovin: izražanje in čiščenje genskega inženiringa

IGF-1 LR3 kot peptidne snovi ni mogoče učinkovito proizvesti v velikem obsegu s kemično sintezo. Glavna metoda je uporaba rekombinantne ekspresijske tehnologije genskega inženiringa za pripravo, njen proces pa je dosegel zrelo preobrazbo iz laboratorijskega testiranja v majhnem obsegu v pilotno testiranje s 150-litrsko fermentacijsko posodo. Posebni koraki so naslednji:

Konstrukcija izraznega sistema

Prednost je treba dati uporabi evkariontskih ekspresijskih sistemov s pogosto uporabljenim sevom Pichia pastoris GS115 kot gostiteljsko celico. Z uporabo tehnologije rekombinacije DNA smo molekulo nukleinske kisline, ki kodira IGF-1 LR3, klonirali v plazmid pPICZ A, da smo zgradili ekspresijski vektor pPICZ-LR3IGF-1. Vektor mora vsebovati elemente, kot so promotorji in selektivni označevalni geni (kot so geni za odpornost na zeocin), da se zagotovi stabilno izražanje ciljnega gena. Nekatera podjetja uporabljajo tudi ekspresijski sistem E. coli, kot na primer izdelki Wuhan Pronosai, ki dosegajo ekspresijo ciljnih proteinov preko E. coli.

Fermentacija visoke gostote

Postopek fermentacije je ključnega pomena za proizvodnjo surovin in potrebno je doseči fermentacijo s hranjenjem v 10-150L fermentacijskih posodah. Optimizirana osnovna parametra sta inokulacijski volumen 4 % in koncentracija IPTG 0,8 mmol/L. Indukcijska metoda vključuje vezavo laktoze in IPTG, indukcijski čas pa je 4 ure. Med postopkom fermentacije je raztopljeni kisik nadzorovan na 40% -60%, pH vrednost pa je stabilna. Po 12 urah fermentacije lahko teža mokrih bakterij doseže 22-24 g/L, raven izražanja ciljnega proteina pa predstavlja 25 % celotnega proteina. Med postopkom fermentacije je potrebno spremljanje parametrov v realnem času, kot so bakterijska biomasa, raztopljeni kisik, pH itd., da se ohrani oskrba s hranili prek sistema samodejnega hranjenja in prepreči kopičenje metabolitov, ki zavirajo izražanje beljakovin.

Bakterijska fragmentacija in zdravljenje inkluzijskih telesc

Po fermentaciji so bile bakterijske celice zbrane s centrifugiranjem in obdelane z ultrazvokom, da so se celice razgradile, pri čemer so se sprostila inkluzijska telesca, ki vsebujejo ciljni protein. Za izboljšanje čistosti inkluzijskih teles so potrebna trikratna gradientna pranja. Najprej dvakrat sperite z 2 mol/l sečnine in nato enkrat sperite s pufrom PBS. Po zdravljenju se lahko delež ciljnih beljakovin v inkluzijskih telescih poveča na 50 %. Nato so bila inkluzijska telesca raztopljena v denaturacijski raztopini (pH 8,0), ki je vsebovala 8mol/L sečnine, 0,1mol/L Tris HCl in 10mmol/L DTT, da se zagotovi popolno odvijanje proteina in pripravi za nadaljnje ponovno zvijanje.

Renaturacija in čiščenje beljakovin

Za ponovno zvijanje se uporablja metoda z redčenjem, najprimernejša formula raztopine za ponovno zvijanje pa je 0,1 mol/L Tris HCl, 1 mmol/L EDTA, 3 mmol/L oksidiranega glutationa, 1 mmol/L reduciranega glutationa in 1 % glicina (pH 8,0). Po redčenju beljakovine mešamo pri 4 stopinjah 12 ur, da pospešimo pravilno zvijanje. V procesu čiščenja se uporablja kombinirani postopek kromatografije. Najprej odstranimo majhne molekularne nečistoče z gelsko kromatografijo Sephadex G -50 in nato dodatno očistimo s SP - Sepharose F. F ionsko izmenjevalno kromatografijo. Končno dobimo protein IGF-1 LR3 visoke čistosti. Njegova molekulska masa in zaporedje aminokislin sta popolnoma skladna s teoretično vrednostjo z detekcijo.

Priprava liofiliziranega{0}}praška

Prečiščena beljakovina je obdelana s tehnologijo-sušenja z zamrzovanjem, voda pa je neposredno sublimirana iz trdne v plinasto okolje pri nizki temperaturi in nizkem tlaku, pri čemer nastane stabilen bel kristalinični prah. Ta proces zagotavlja, da beljakovine ostanejo aktivne med shranjevanjem in transportom. Zamrznjeno posušen prah lahko stabilno shranite več tednov pri sobni temperaturi in ga lahko shranite več let pri -80 stopinjah.

Oblikovanje formulacije: ključni postopek pri pripravi tablet

Lastnosti peptidovIGF 1 LR3 tabletaga naredijo občutljivega na gastrointestinalno okolje, formulacije tablet pa morajo obravnavati vprašanja, kot sta nizka biološka uporabnost in dovzetnost za encimsko razgradnjo. Zato je potrebna ciljna optimizacija pri oblikovanju recepta in izbiri postopka. Postopek oblikovanja njegove formulacije se nanaša na splošni postopek peptidnih tablet in je prilagojen glede na lastne značilnosti, kot sledi:

1

 

Oblikovanje receptov in pregled pomožnih snovi

Zasnova recepta mora upoštevati stabilnost beljakovin, hitrost raztapljanja in sposobnost oblikovanja. Kot razredčila je treba uporabiti mikrokristalno celulozo in laktozo v razmerju približno 3:1, da se zagotovi trdota tablete in olajša raztapljanje; Lepilo uporablja 5% vodno raztopino polivinilpirolidona K30, da se prepreči poškodba proteinske strukture z organskimi topili; Izbrano sredstvo za razpadanje je zamrežena natrijeva karboksimetilceluloza z dodano količino 3 % -5 %, da se zagotovi hiter razpad tablete v prebavnem traktu; Uporabljeno mazivo je magnezijev stearat z odmerkom 0,5 % za zmanjšanje trenja med stiskanjem; Istočasno dodajanje 1% -2% meglumina kot solubilizatorja za izboljšanje topnosti IGF-1 LR3 v vodi.

2

 

Drobljenje in sejanje

Zmleti liofilizirani prašek IGF-1 LR3 in pomožne snovi ločeno skozi drobilnik z zračnim tokom, pri čemer nadzirate velikost delcev D90 surovine pri 20–30 μm in uskladite velikost delcev pomožnih snovi s surovino, da preprečite neenakomerno mešanje zaradi razlik v velikosti delcev. Po drobljenju precedite skozi sito z velikostjo odprtin 80, da odstranite zlepljene delce in nečistoče ter tako zagotovite tekočnost materiala.

3

 

Mešanje in granulacija

Surovino IGF-1 LR3 smo najprej 30 minut mešali z razredčilom in dezintegratorjem z enakomerno inkrementalno metodo, da smo zagotovili enakomerno disperzijo surovine. Nato smo dodali polivinilpirolidonsko lepilo K30 in izvedli mokro granulacijo z uporabo vrtljivega granulatorja (16 mesh sito) za granulacijo. Mokre delce je treba sušiti pri 40-45 stopinjah 2-3 ure, z nadzorovano vsebnostjo vlage 3% -5%. Temperaturo sušenja je treba strogo nadzorovati, da preprečimo denaturacijo beljakovin zaradi visokih temperatur. Po sušenju se delci presejejo skozi sito 20 mesh, da se odstranijo veliki delci in fin prah.

4

 

Stiskanje tablet

Izberite 8 mm plitvo konkavno matrico za stiskanje tablet, s stiskalno silo, nadzorovano pri 18-20KN, trdoto tablete, ki se vzdržuje pri 60-80N, in razliko v teži tablete, nadzorovano v okviru ± 3 %. Med postopkom stiskanja tablet je potrebno spremljanje teže, trdote in krhkosti tablet v realnem času z vzorčenjem in testiranjem vsakih 15 minut, da se izognemo napakam v kakovosti, ki jih povzročijo nihanja parametrov opreme. Hkrati mora biti stiskalnica za tablete podvržena aseptični obdelavi, proizvodno okolje pa je treba nadzorovati v čistem območju na ravni D s temperaturo 18-26 stopinj in relativno vlažnostjo 45% -65%.

5

 

Premaz

Za zaščito IGF-1 LR3 pred poškodbami, ki jih povzročajo gastrointestinalni encimi, se uporablja postopek premazovanja s tankim filmom. Raztopina za premaz uporablja predmešanico OBA, razredčeno s prečiščeno vodo do koncentracije 15 % in premazano z uporabo učinkovitega stroja za premazovanje. Med postopkom nanašanja je treba temperaturo vstopnega zraka nadzorovati na 45-50 stopinj, temperaturo izstopnega zraka na 30-35 stopinj, hitrost škropljenja na 5-8 ml/min, teža premaza pa se mora povečati za 2-3%. Površina obloženih tablet je gladka, kar lahko upočasni raztapljanje v želodcu, hitro sprošča zdravila v črevesju in izboljša biološko uporabnost.

 

Osnovna proizvodna oprema in funkcije

Proizvodna oprema zaIGF 1 LR3 tabletapokriva več področij, kot so biološka fermentacija, oblikovanje formulacij ter pregled in testiranje. Natančnost in stabilnost opreme neposredno vplivata na kakovost izdelka. Poseben seznam opreme in funkcije so naslednji:

Priljubljena oznake: igf 1 lr3 tableta, dobavitelji, proizvajalci, tovarna, veleprodaja, nakup, cena, razsuto, naprodaj