Pentagastrin CAS 5534-95-2

Ciljno zaporedje: Boc- -Ala-Trp-Met-Asp-Phe-NH₂. Sprejeta je strategija zaporedne kondenzacije AC-to-N terminala, pri čemer L-fenilalaninamid služi kot C-terminalni začetni material.

Selektivna zaščita stranske-verige je izvedena za posamezne aminokisline: -karboksilna skupina asparaginske kisline je zaščitena z benzilnim zaestrenjem, indolni del triptofana je podvržen blagim omejitvam, Boc pa se uporablja za prehodno zaščito amino-skupine.

Z uporabo klasičnega DCC/HOBt kot kondenzacijskih reagentov poteka pripajanje pri nizki temperaturi v DMF z zaporedno vključitvijo Asp, Met in Trp, čemur sledi končna konjugacija z Boc- -alaninom.

Po-kondenzacija, nizko{1}}temperaturna hidrogenoliza odstrani zaščitne skupine stranske-verige na osnovi benzila-, preostale Boc skupine v sledovih pa se odcepijo pod blago obdelavo s TFA.

Koncentrirani surovi produkt se rekristalizira iz sistema topil z mešanico acetonitrila-vode. Zaradi nizkih kapitalskih naložb v proizvodno opremo je bil ta postopek splošno sprejet za zgodnjo proizvodnjo zdravil v razsutem stanju s skupnim izkoristkom v razponu od 32 % do 38 %. Njegove glavne pomanjkljivosti vključujejo okorno vmesno izolacijo in čezmerno odvajanje odpadkov, kar vodi v postopno zamenjavo s tehnologijo sinteze trdne-faze.

2-klorotritil kloridna smola (CTC smola) je izbrana kot trdna podlaga. Fmoc-Phe-NH₂ je najprej zasidran na matrico smole, nezasedena reaktivna mesta smole pa so prekrita z metanolom.

Z DMF kot reakcijskim medijem se deprotekcija Fmoc zaključi s piperidinom, karboksilna aktivacija pa se izvede s HBTU/HOBt. Fmoc-Asp(OBzl), Fmoc-Met in Fmoc-Trp so zaporedno sklopljeni od C-konca proti N-koncu, terminalni Boc- -Ala (Fmoc{-free) pa je uveden v zadnjem koraku.

Odcepitev od smole in globalna odstranitev zaščite stranske{0}}verige se izvedeta pri sobni temperaturi s koktajlom cepitve TFA; smolo odstranimo s filtracijo, koncentrirani filtrat pa podvržemo preparativnemu čiščenju HPLC z reverzno{1}}fazo na koloni C18 z gradientnim eluiranjem acetonitrila-vode, čemur sledi liofilizacija, da dobimo -razsute farmacevtske surovine visoke čistosti s čistostjo večjo ali enako 98,5 % in skupnim izkoristkom med 52 % in 60 %.

Ta metoda ima minimalne stranske reakcije in preprosto čiščenje ter je v skladu s proizvodnimi specifikacijami za farmakopejske-aktivne farmacevtske sestavine. V zadnjih letih so optimizirani okolju-prijazni postopki, ki uporabljajo reagente za razgradnjo-brez fluora, drastično zmanjšali onesnaževanje odpadne-vode in postali prednostna proizvodna tehnologija za proizvajalce farmacevtskih izdelkov po vsem svetu.

Leta 1905 je britanski fiziolog Edkins postavil hipotezo, da sluznica antralnih prekatov izloča gastrin, humoralni faktor, ki modulira izločanje želodčne kisline preko krvnega obtoka.

Zaradi nezadostnih tehnologij čiščenja je ta hipoteza ostala sporna in nedokazana skoraj pol stoletja. Leta 1926 je kitajski fiziolog Lin Kesheng s poskusi na živalih potrdil obstoj gastrointestinalnih endokrinih snovi in ​​dopolnil fiziološki okvir hipoteze o gastrinu, vendar naravni monomerni gastrin ni bil izoliran.

Šele leta 1959 sta Gregory in Tracy z Univerze v Liverpoolu v Združenem kraljestvu očistila naravni heptadekapeptid gastrin G17 iz antralne sluznice prašičev z uporabo protitočne porazdelitve in gelske kromatografije Sephadex. Njihovo preverjanje njegove kislinsko-stimulativne aktivnosti je postavilo trdne kemijske in fiziološke temelje za raziskave gastrina.

Leta 1964 je ista raziskovalna skupina končala popolno sekvenciranje aminokislin G17. Segmentna sinteza in presejanje sta potrdila, da C-terminalni tetrapeptid Trp-Met-Asp-Phe-NH₂ predstavlja farmakoforično jedro, ki v celoti ohranja sposobnost vezave-nativnega gastrinskega receptorja in stimulativno aktivnost-želodčne kisline, medtem ko dolgo N-terminalna aminokislinska veriga uravnava le presnovo in-in vivo brez bistvene farmakološke funkcije.

V ozadju nujnega kliničnega povpraševanja po standardiziranih diagnostičnih reagentih za delovanje želodčne kisline ter visokih stroškov in omejene ponudbe ekstrahiranega naravnega heptadekapeptida je ICI Pharmaceuticals sodeloval s fiziološkimi raziskovalci, da bi začeli razvojni projekt.

S konjugacijo Boc-zaščitenega -alanina na amino konec aktivnega tetrapeptida je bil skonstruiran stabilnejši pentapeptidni derivat, ki se upira hitri encimski hidrolizi in vivo.

Popolna kemijska sintezapentagastrinje izvedla Konturekova raziskovalna skupina leta 1967 s-in{1}}in vitro in preskusi na živalih, ki so potrdili njegovo sekretagogno-kislo-sekretagoško moč, enakovredno naravnemu gastrinu. Sredstvo je istega leta pridobilo dovoljenje za trženje v Evropi in je od takrat postalo zlati-standardni reagent za testiranje izločanja želodčne kisline.

Poznejše odobritve so bile izdane v Združenih državah, na Japonskem in Kitajskem za presejanje gastrinoma in oceno delovanja parietalnih celic. Od leta 1990 se je njegova uporaba razširila na temeljne raziskave kot farmakološko orodje, ki cilja na receptor CCK-B, in do danes ostaja klasična referenčna spojina v prebavni farmakologiji.